ラット・マウスの抗体精製に最適なゲル担体
- プロテインGゲルの1/5量でOK!
- 中性で結合することにより、抗体の活性を保持
- 非特異的吸着が少ないため、95%以上の高純度抗体を取得!
Ab-Capcherとは?
プロテノバ社の特許技術により開発された耐アルカリ性の抗体結合タンパク質 Protein A-R28を多点で高密度に固定化したゲル担体 Ab-capcherは、従来のプロテインAゲルの限定された適応抗体種やプロテインGゲルの結合量の低さを解決した画期的なアフィニティゲル担体です。
Ab-Capcherの結合特性
種名 | サブクラス | Ab-Cap | Protein A | Protein G |
マウス | lgG1 lgG2a lgG2b lgG3 | ++++ +++++ ++++ +++++ | + ++++ | ++ + |
ラット | lgG1 lgG2a lgG2b lgG2c | ++++ - ++++ ++++ | - - | + + |
ヤギ | lgGs | ++++ | - | + |
ニワトリ | lgY | - | - | - |
ヒト | lgG | +++++ | ++++ | ++ |
ウサギ | lgG | +++++ | ++++ | ++ |
商品仕様
商品形態: | 20%エタノール中に懸濁(50%スラリー) |
ゲルマトリックス: | アガロース |
粒子径: | 45-165μm |
リガンド: | アルカリ耐性ProteinA誘導体(Protein A-R28) (E.coli) |
結合容量: | >65 mg human lgG/ml gel |
保存条件: | 20%エタノール中にて冷蔵保存 |
ヒトlgG精製(~70mg/mL gel)
結合buffer: | 20mM リン酸 buffer,150mM Nacl,pH7.2 |
溶出buffer: | 0.1 M Glycine-HCl,pH2.8 |
中和buffer: | 1M Tris(溶出bufferの1/30量程度加える) |
ゲル洗浄buffer: | 0.1 N NaOHの使用が可能 |
マウスlgG精製(~40mg/mL gel)
高収量buffer例
結合buffer: | 1.5 M Glycine/3M Nacl,PH9.0 |
溶出buffer: | 0.1 M Glycine-HCl,pH2.8 |
中和buffer | 1M Tris(溶出bufferの1/30量程度加える) |
ゲル洗浄buffer | 0.1 N NaOHの使用が可能 |
結合バッファにPBSを使用した場合、結合量は約20 mg/mL gelとなります(当社データ)
Protein A-R28 は、プロテノバ社の特許技術を用いて開発されたアルカリ耐性を有する抗体結合タンパク質です。従来のプロテインAやプロテインGに比べて結合力が高く、様々な種類のIgGを補捉することができます。Protein A-R28を固定化したアガロースゲル担体(Ab-capcher)はアルカリでの洗浄が可能で、ヒトやマウスなどの種々のIgGに対して高い結合能を有します。本製品は、抗体精製用のみならず免疫沈降などへの幅広い応用が可能です。 |
よくある質問
抗体精製例(バッチ法)
Ab-Capcherゲルによる抗体精製手順の一つとして、バッチ法による精製例を紹介します。
必要な試薬・器具
- Ab-Capcher
- 遠心チューブ(使用するゲル量の5倍以上容量のものが望ましい)
- スピンカラム(例.Ultrafree MC(MILLIPORE))
- Buffer類
結合buffer:PBS
溶出buffer:0.1M Glycine-HCl, pH2.8
中和buffer:1 M Tris
精製手順
1.Ab-Capcherゲルを遠心チューブに入れ、ゲルの3-5倍量の結合bufferを加えて、5分間混合した後、遠心してゲル上部の液を廃棄する。この操作を3回繰返す。
※サンプルがスピンカラムに全量入る場合は、Ab-Capcherゲルをスピンカラムに入れて上記操作を行う。
2.調製したサンプルを同チューブに加え、室温にて1~2時間振とうする。
3.サンプルとゲルの混合物をスピンカラムに移し、遠心して素通り画文を回収する。
4.同スピンカラムにゲルの3~5倍量の結合bufferを加えて5分間混合した後、遠心してbufferを破棄する。この操作を5回繰返す。
5.溶出bufferをゲル量の1~2倍量加えて10分間混合した後、遠心して溶出画分を回収する。回収した溶出画文に1/30量程度の中和bufferを加えて混合する。この操作を3~6回(溶出液の合計がゲル量の3倍量となる量)繰返す。
価格表
品名 | 容量 | Code No. | 価格(税別) |
Ab-Capcher | 2 mL | P-002-2 | ¥25,000 |
10 mL | P-002-10 | ¥75,000 | |
100 mL | P-002-100 | お問い合わせください | |
200 mL | P-002-200 | お問い合わせください |